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多肽固相合成的基本原理及流程

作者:科肽生物发表时间:2024-01-17浏览量:295

多肽固相合成是一种在固体支持物上逐步合成多肽的方法。这种方法具有高产率、高纯度和高度可控制性等优点,因此在生物制药、蛋白质工程和化学生物学等领域具有广泛的应用前景。


多肽固相合成的基本原理:


1. 将目标多肽的C端连接到一个不溶于水的固体支持物(如树脂)上,形成一个C端固定化的多肽链。


2. 通过化学反应,将目标多肽的N端与下一个氨基酸分子连接起来,形成一个新的多肽链。


3. 重复步骤2,直到目标多肽的所有氨基酸都被连接在一起。


4. 最后,通过化学反应将多肽从固体支持物上切割下来,得到目标多肽。


多肽固相合成的基本流程:


1. 选择适当的固体支持物:根据目标多肽的性质和需求,选择合适的固体支持物。常用的固体支持物有Rink酰胺树脂、Wang树脂等。


2. 活化固体支持物:将固体支持物与适当的活化剂反应,使其具有与氨基酸发生化学反应的能力。


3. 连接第一个氨基酸:将目标多肽的第一个氨基酸与活化后的固体支持物反应,形成C端固定化的多肽链。


4. 添加保护基团:为了防止氨基酸之间的副反应,需要对每个氨基酸的活性官能团进行保护。常用的保护基团有Fmoc、Trt等。


5. 去除保护基团:在添加下一个氨基酸之前,需要先去除当前氨基酸的保护基团,以便其与下一个氨基酸发生化学反应。这一步通常使用脱保护剂完成。


6. 连接下一个氨基酸:将目标多肽的下一个氨基酸与去保护后的固体支持物反应,形成一个新的多肽链。


7. 重复步骤4-6,直到目标多肽的所有氨基酸都被连接在一起。在这个过程中,需要不断调整反应条件,以确保每个氨基酸都能正确地连接到固体支持物上。


8. 切割多肽:将多肽从固体支持物上切割下来,得到目标多肽。这一步通常使用切割剂完成。

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