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固相液相合成多肽区别

作者:科肽生物发表时间:2024-01-24浏览量:274

固相合成是在固体支持物表面进行的多肽合成方法,这种方法由R. Bruce Merrifield在1963年发明。固相合成的主要步骤包括:


1. **载体活化**:选择一个固体支持物,如聚苯乙烯树脂,作为载体,并将其活化以便能够与氨基酸的氨基端相连。

2. **氨基酸耦合**:按照所需多肽序列的顺序,依次将保护的氨基酸耦合到活化的载体上。每次耦合后,需要去除氨基酸的保护基团。

3. **洗涤去保护**:每步耦合后,通过过滤和洗涤去除未反应的物质和副产物。

4. **切割和脱保护**:完成所有氨基酸的耦合后,将多肽从载体上切割下来,并去除所有侧链的保护基团。

5. **纯化**:通过高效液相色谱(HPLC)等方法对合成的多肽进行纯化。


固相合成的优点包括自动化操作、产物纯度高、适合大规模生产。但是,这种方法成本较高,且对于长链多肽的合成效率较低,可能会出现聚合困难和副反应。


### 液相合成(Solution-Phase Peptide Synthesis, SPPS)


液相合成是在溶液中进行的多肽合成方法,它不需要固体支持物。液相合成的步骤通常包括:


1. **保护氨基酸**:首先将所有参与合成的氨基酸的活性侧链保护起来。

2. **逐步耦合**:在溶液中依次加入保护的氨基酸,并通过耦合剂促进肽键的形成。

3. **去保护和耦合**:每加入一个氨基酸后,需要去除其氨基的保护基团,然后继续下一个氨基酸的耦合。

4. **纯化**:合成完成后,通过各种化学和物理方法纯化目标多肽。


液相合成的优点是可以用于8个氨基酸以内多肽,且成本相对较低。但是,由于反应在溶液中进行,且难以实现自动化。


### 总结


固相液相合成多肽各有优势和局限性。固相合成适合自动化和合成短至中等长度的多肽,产物纯度高,但成本较高;而液相合成成本较低,适合合成8个氨基酸以内多肽,但纯化过程可能更为复杂。在选择合成方法时,需要考虑所需的多肽序列、长度、纯度要求以及成本等因素。

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